Immunoferment tahlil metodlari

Immunoferment tahlil metodlari Hozirgi vaqtgacha prinsipial va ikkinchi darajali farqlari bilan IFA o'tkazishning katta miqdordagi, turli xil variantlari ishlab chiqilgan. Aniq ko'rib chiqilgan IFA metodlari obzorlari nashr qilingan. Shunda ham IFAning turli - tuman medotlarining aniq bir klassifikatsiyasi adabiyotlarda yo'q. Bu umumiy qonuniyatlarni va turli xil metodlarni qiyosiy baholashda qiyinchilik tug'diradi. Odatda IFA metodlarini muhokama qilish barcha metodlarning geterogen va gomogenlarga bo'lish ya'ni tahlilning qattiq faza ishtiroki bilan yoki faqat suyuqlikdagi barcha bosqichlarni prinsp bo'yicha o'tkazish amalga oshiriladi. IFA metodlari klassifikatsiyasi Immunoferment va boshqa xohlagan immunokimyoviy tahlilda birinchi jarayon analiz qilinuvchining unga spetsifik bog'lanadigan antitelani bilish bosqichi hisoblanadi. Shunday qilib immunokimyoviy komplekslar hosil qilish jarayoni affinnost bilan, komponentlar konsentratsiyalari va reaksiya sharoitlari bilan ta'minlangan qat'iy sanoq nisbatida bo'lib o'tadi, u holda analiz qilinuvchi bieikmaning dastlabki konsentratsiyasini aniqlash uchun hosil bo'ladigan immune komplaksning miqdoriy bahosi yetarli bo'ladi. Antigenlarni analiz qilish paytida bunday baholashni o'tkazish uchun 2 ta yondashish mavjud: Hosil bo'lgan immunokimyoviy komplekslar konsentratsiyasini to'g'ridan-to'g'ri o'lchash Erkin qolgan ya'ni antitelolarning antigan bilan kompleks hosil qilish reaksiyasiga kirmaydigan konsentratsiyalarni aniqlash. Ko'rinib turibdiki, bunday paytda immunokompleks hosil qilish miqdori qo'shilgan antitelolar umumiy miqdoning turlichaligi va erkin holda qolgan antitelolar miqdori bo'yicha aniqlanadi. Antitelolar analizida bu yondashish analogik qoladi (aynan shunday qoladi), biroq 4.1 sxemada At va Ag o'rinlari simmetrik almashadi. Bunda yo kompleksining o'zi, yo antigen kompleksiga bog'lanmagan erkin holda qolganlari ham aniqlanadi. Sxema - 4.1 Oddiy binary ko'mplek paydo qilishda kompanentlarning juda past konsentratsiyasida antigen-antitelo visual ham oddiy instrumental metodlar bilan ham registratsiya qilinishi mumkin emas, bu analitik sistemaning qiyinlashishiga (murakkabligiga) olib keladi. Kompleks hosil qilishdagi vizualizatsiya yo'llaridan biri belgilangan birikmalardan foydalanish bo'ladi, ya'ni unda analiz qilinayotgan birikmalarning aniqlanayotgan konsentratsiyasi bilan solishtirilayotgan konsentratsiyasida belgi mumkin. Qoidadagidek belgi tipidan analiz nomlari kelib chiqadi. Radioimmunologik analiz, flyurosen immunoanaliz, immunokofaktor analiz, immunoferment analiz. Belgi sifatida immunoanalizda fermentlarni qo'llash imkoniyati ta'minlangan, avvalo, uning yuqori katalitik faolligi bilan substrat sistemalar muvofiq qo'llash bilan eritmada 10-15 M undan past fermentlarni registratsiyalash. Ikkinchi umumiy bosqichda har qanday IFA metodi belgilangan fermentning spetsifik kompleks yoki bog'lanishning erkin markazi bilan aloqa hosil qilishidir. Ayrim sxemalarda (konkurent analiz) kompleksni belgilangan ferment bog'lanishi bilan hosil bo'lishi birinchi bosqich spetsifik antigenlarning antitelolarni bilish bosqichi bilan bir vaqtda o'tishi mumkin. Va nihoyat IFA da oxirgi kerakli, majburiy har xil fizik kimyoviy metodlar (spektrofotometrik-bunda substrat bilan germent reaksiyasini o'rkazish yo'li bilan erishiladi. flyurometrik, lyumisentnik va h.k.) bilan o'lchangan signal muvofiqligida belgi ferment transformatsiyasidir. IFA ning barcha metodlarida maxsus immune kompleksda yoki erkin, bog'lanish markazi reaksiyasiga kirmaydigan ...